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    免疫熒光染色實(shí)驗(yàn)操作步驟
    免疫熒光染色實(shí)驗(yàn)操作步驟
    更新時(shí)間:2025-02-05
    訪問量: 4277
    廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家

    服務(wù)名稱:免疫熒光染色操作步驟
    規(guī)格:切片
    價(jià)格:80
    收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)/服務(wù)周期/提供結(jié)果:
    歡迎咨詢?cè)斦?,我們?huì)根據(jù)您的方案及需求制定詳細(xì)的服務(wù)協(xié)議。
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    免疫熒光染色實(shí)驗(yàn)操作步驟產(chǎn)品概述:

    免疫熒光染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)

     

     

    、制片

    選無(wú)自發(fā)性熒光的石英玻片或普通優(yōu)質(zhì)玻片,洗凈后浸泡于無(wú)水乙醇和乙氧基乙烷等量混合液中。用時(shí)取出用綢布擦凈。將待檢樣品如組織塊剪成適當(dāng)大小印壓于玻片上。也可采用冰凍切片或石蠟切片樣品。

     

    二、固定

    除研究細(xì)胞表面抗原或不穩(wěn)定抗原可不固定外,--般均應(yīng)固定。

    固定的作用有三:

    1.防止標(biāo)本從玻片上脫落。

    2.除去防礙抗原抗體結(jié)合的類脂,使抗原抗體結(jié)合物易于獲得良好的染色結(jié)果。

    3.固定的標(biāo)本易于保存,如組織切片固定后在-20%C下可保存一年而不改變其染色特性。

    標(biāo)本的固定原則是:

    1.不能損傷細(xì)胞內(nèi)的抗原。

    2.不能凝集蛋白質(zhì)。

    3.不能損傷細(xì)胞形態(tài)。

    4.固定后應(yīng)保持細(xì)胞膜的通透性,以允許抗體進(jìn)入與抗原結(jié)合。

     

    三、水洗

    固定后以冷的0.01 Mol/L pH7 4PBS液浸泡沖洗,后以蒸餾水沖洗,防止自發(fā)性熒光。

     

    四、染色

    染色分直接染色法與間接染色法。

    1.材料與試劑

    (1)熒光抗體,稀釋至應(yīng)用濃度。

    (2) 0.01 Mol/L pH7 .4PBS液

    (3) 9份優(yōu)質(zhì)甘油加1份pH7 .4PBS液即為甘油緩沖液。甘油有減少非特異性熒光的作用。

    (4)帶蓋方盤

    2. 直接染色法

    (1)將固定好的玻片置于濕盤中,滴加熒光抗體染色液,以覆蓋為度,加蓋,37°C感做30min~45min.

    (2) PBS沖洗3次,每次沖洗3 min,即3x3沖洗。

    (3)蒸餾水沖洗。

    (4)滴甘油緩沖液一滴,封片,熒光顯微鏡檢查。

     

    3.間接染色法

    (1) 檢查抗原:

    ①取固定標(biāo)本,加已知的免疫血清,37°C孵育30 min。

    ②以PBS液3x3沖洗。

    ③再加熒光標(biāo)記的抗抗體,37°C孵育30 min。

    ④PBS 3x3沖洗。

    ⑤H2O沖洗,涼干。

    ⑥加甘油緩沖液,封片、鏡檢。

    (2)檢查抗體:

    ①兔疫后動(dòng)物的淋巴組織涂片,自然干燥,甲醇固定。

    ②滴加相應(yīng)抗原液(按1: 100~1: 500稀釋), 37°C孵育30 min.

    ③PBS液3x3沖洗。

    ④加熒光抗體,37°C孵育30 min.

    ⑤PBS液3x3沖洗。

    ⑥水洗,干。

    ⑦加甘油緩沖液,封片、鏡檢。

     

    [項(xiàng)目開展范圍]慢病毒,腺病毒,RNAI類, 分子生物實(shí)驗(yàn),病理實(shí)驗(yàn),免疫學(xué)實(shí)驗(yàn),細(xì)胞實(shí)驗(yàn),動(dòng)物實(shí)驗(yàn),蛋白組學(xué)實(shí)驗(yàn),芯片類實(shí)驗(yàn),并為廣大客戶朋友們提供課題設(shè)計(jì)指導(dǎo)、基金申請(qǐng)指導(dǎo)、SCI. 核心期刊等服務(wù)。

     

     

     實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):

     

    免疫組化IHC染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)

    細(xì)胞、組織TUNEL凋亡染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)

    試劑盒免費(fèi)代檢測(cè)

    實(shí)驗(yàn)室代做實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目

     

    透射電鏡服務(wù)實(shí)驗(yàn)服務(wù)

    石蠟/冰凍切片TUNEL凋亡

    核仁組成區(qū)嗜銀-AGNOR染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)

    免疫共沉淀(CHIRP)實(shí)驗(yàn)

    RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀(RIP)實(shí)驗(yàn)代做

    酶聯(lián)免疫(ELISA)技術(shù)服務(wù)

    雞傳染性法氏囊病病毒VP2抗體診斷試劑盒

    喹諾酮類快速檢測(cè)試劑盒

    組織芯片/微陣列定制技術(shù)服務(wù)

     

    染色質(zhì)免疫沉淀分析(CLIP)實(shí)驗(yàn)服務(wù)

     

    多因子液相芯片技術(shù)(Luminex)實(shí)驗(yàn)

    免疫細(xì)胞化學(xué)ICC實(shí)驗(yàn)服務(wù)

    ATP/ADP檢測(cè)實(shí)驗(yàn)服務(wù)

    蛋白雙向(2-D)電泳實(shí)驗(yàn)服務(wù)

    蛋白相互作用分析

    堿性磷酸酶染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)

    PKC活性檢測(cè)實(shí)驗(yàn)

    非標(biāo)定量實(shí)驗(yàn)

    (Label-free)

     

    DIGE技術(shù)實(shí)驗(yàn)服務(wù)

    端粒酶活性檢測(cè)實(shí)驗(yàn)

    細(xì)胞生長(zhǎng)曲線的測(cè)定

    掃描電鏡服務(wù)

    NF-KB p65活性檢測(cè)實(shí)驗(yàn)

     

    慢病毒包裝實(shí)驗(yàn)服務(wù)

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