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    人(Human)前列腺素F2a(PGF2a)ELISA檢測試劑盒說明書

    提 供 商: 上海研謹(jǐn)生物科技有限公司 資料大?。?/td>
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    相關(guān)產(chǎn)品:
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    詳細(xì)介紹

    本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷

    人(Human前列腺素F2a(PGF2a)ELISA檢測試劑盒

    使用說明書

    檢測原理

    試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被前列腺素F2a(PGF2a)抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的前列腺素F2a(PGF2a)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。

    樣品收集、處理及保存方法

    1.  血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

    2.  血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

    3.  細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

    4.  組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

    5.  保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

    自備物品

    • 酶標(biāo)儀(450nm)
    • 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
    • 37℃恒溫箱

    操作注意事項(xiàng)

    1.   試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用。
    2.   實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
    3.   濃度為0的S0號標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對照或者空白;按照說明書操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋5倍,終結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。
    4.   嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。
    5.   所有液體組分使用前充分搖勻。

    試劑盒組成

    名稱

    96孔配置

    48孔配置

    備注

    微孔酶標(biāo)板

    12孔×8條

    12孔×4條

    標(biāo)準(zhǔn)品

    0.3mL*6管

    0.3mL*6管

    樣本稀釋液

    6mL

    3mL

    檢測抗體-HRP

    10mL

    5mL

    20×洗滌緩沖液

    25mL

    15mL

    按說明書進(jìn)行稀釋

    底物A

    6mL

    3mL

    底物B

    6mL

    3mL

    終止液

    6mL

    3mL

    封板膜

    2張

    2張

    說明書

    1份

    1份

    自封袋

    1個(gè)

    1個(gè)

    注:標(biāo)準(zhǔn)品(S0-S5)濃度依次為:0、3、6、12、24、48 pg/mL

    試劑的準(zhǔn)備

     20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。

    洗板方法

    1.   手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。
    2.   自動(dòng)洗板機(jī):每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。

    操作步驟

    1.   從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
    2.   設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
    3.   樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。
    4.   除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
    5.   棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
    6.   每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
    7.   每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

    結(jié)果判斷

     繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在Excel工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對應(yīng)OD值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。

     

    試劑盒性能

    •  準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。
    •  靈敏度:DI檢測濃度小于1.0 pg/mL。
    •  檢測范圍:1- 48 pg/mL。
    •  特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
    •  重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
    •  貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
    •  有效期:6個(gè)月

    免責(zé)聲明

    •   試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或體實(shí)驗(yàn),否則所產(chǎn)生的一切后果,由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān),本公司概不負(fù)責(zé)。
    •   嚴(yán)格按照說明書操作,實(shí)驗(yàn)者違反說明書操作,后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。

    ?

     

    實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):

     

    免疫組化IHC染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)

    細(xì)胞、組織TUNEL凋亡染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)

    試劑盒免費(fèi)代檢測

    實(shí)驗(yàn)室代做實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目

     

    透射電鏡服務(wù)實(shí)驗(yàn)服務(wù)

    石蠟/冰凍切片TUNEL凋亡

    核仁組成區(qū)嗜銀-AGNOR染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)

    免疫共沉淀(CHIRP)實(shí)驗(yàn)

    RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀(RIP)實(shí)驗(yàn)代做

    酶聯(lián)免疫(ELISA)技術(shù)服務(wù)

    雞傳染性法氏囊病病毒VP2抗體診斷試劑盒

    喹諾酮類快速檢測試劑盒

    組織芯片/微陣列定制技術(shù)服務(wù)

     

    染色質(zhì)免疫沉淀分析(CLIP)實(shí)驗(yàn)服務(wù)

     

    多因子液相芯片技術(shù)(Luminex)實(shí)驗(yàn)

    免疫細(xì)胞化學(xué)ICC實(shí)驗(yàn)服務(wù)

    ATP/ADP檢測實(shí)驗(yàn)服務(wù)

    蛋白雙向(2-D)電泳實(shí)驗(yàn)服務(wù)

    蛋白相互作用分析

    堿性磷酸酶染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)

    PKC活性檢測實(shí)驗(yàn)

    非標(biāo)定量實(shí)驗(yàn)

    (Label-free)

     

    DIGE技術(shù)實(shí)驗(yàn)服務(wù)

    端粒酶活性檢測實(shí)驗(yàn)

    細(xì)胞生長曲線的測定

    掃描電鏡服務(wù)

    NF-KB p65活性檢測實(shí)驗(yàn)

     

    慢病毒包裝實(shí)驗(yàn)服務(wù)

    滬公網(wǎng)安備 31011802001676號

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