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    ZJU-0430+luc人膽囊癌細胞+luc傳代/復蘇技巧
    點擊次數(shù):379 更新時間:2024-08-21

    ZJU-0430+luc人膽囊癌細胞+luc

    ,ZJU0430 luc

    貨號:YJ-0024a(STR(ZJU0430鑒定))

    價格: 3200.0

    規(guī)格: 1*10 6

    細胞描述

    細胞是從一名74歲男性胃膽囊癌患者組織中分離得到,ZJU-0430的遷移,侵襲和增殖能力遠大于GBC-SD細胞,可用于膽囊癌(GBC)的發(fā)病機理和治療的臨床前研究,并可能有助于開發(fā)早期診斷工具以及潛在的靶向療法。

    該細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶Luc基因。

    細胞特性

    1 來源:人,男性,膽囊癌

    2 形態(tài):上皮樣,貼壁生長

    3 含量:>1x106  細胞數(shù)

    4 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

    5)  用途:僅供科研使用。

    細胞篩選

    該細胞為穩(wěn)定轉染Luc的細胞,隨細胞傳代次數(shù)的增加,其Luc熒光強度會逐漸減弱。若實驗要求需要維持熒光強度,可以加入嘌呤霉素進行再次篩選。        

    建議收到細胞后至少傳3代,凍存留種后再進行篩選。

    初次進行細胞篩選時,建議加入終濃度為1ug/ml嘌呤霉素的完全培養(yǎng)基維持培養(yǎng),若無細胞漂浮或者漂浮較少,即可更換為含2ug/ml嘌呤霉素的完全培養(yǎng)基繼續(xù)篩選,以此類推,至最高藥物濃度為5ug/ml。若篩選過程中,漂浮細胞大于60%,則停止篩選,換成正常培養(yǎng)基培養(yǎng),至細胞密度約80%,可繼續(xù)加入同濃度嘌呤霉素進行篩選。當加入5ug/ml嘌呤霉素時細胞正常增殖,可停止篩選,用不含藥完全培養(yǎng)基正常培養(yǎng)。

    一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

    1) 準備:1640 基礎培養(yǎng)基(推薦:YJ-0002),優(yōu)質胎牛血清10 %,P/S 1 %

    2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

    3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

    二.細胞處理:

    1 凍存細胞的復蘇:

    將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

    2 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。 

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    實驗技術服務:

     


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