性欧美熟妇,综合另类人妻,人妻系列免费无码专区,久久精品蜜芽,亚洲色婷婷在线

  1. 當(dāng)前位置:
    首頁 > 技術(shù)文章 > 恩諾沙星藥物相應(yīng)殘留含量檢測試劑盒說明書
    目錄導(dǎo)航 Directory
    服務(wù)熱線
    技術(shù)支持Article
    恩諾沙星藥物相應(yīng)殘留含量檢測試劑盒說明書
    點擊次數(shù):1752 更新時間:2022-04-11

                             

    恩諾沙星

    快速檢測試劑盒說明書

    一、原理

        試劑盒采用間接競爭ELISA方法,在微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原,樣本中的殘留物恩諾沙星藥物和微孔條上預(yù)包被的偶聯(lián)抗原競爭抗恩諾沙星藥物抗體,加入酶標(biāo)記物后,用TMB底物顯色,樣本吸光值與其所含殘留恩諾沙星藥物的含量成負(fù)相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出相應(yīng)殘留物恩諾沙星藥物的含量。

    二、試劑盒特性

    試劑盒靈敏度:      1ppb

    孵育溫度:          25

    孵育時間:          30min15min

    樣本檢測下限

    恩諾沙星檢測下限      ····················  1ppb

    交叉反應(yīng)率

    恩諾沙星        ··························    100%

    樣本回收率

    組織 /雞蛋 ···································  80±15%

      清  ······································  80±15%

      蜜  ······································  75±15%

    三、試劑盒組成

    1

    微量測試孔

    每條8孔,一板12

    2

    標(biāo)準(zhǔn)液×6

    1ml/瓶)

    0ppb

    1ppb

    3ppb

    9ppb

    27ppb

    81ppb

    3

    酶標(biāo)記物

    7ml

    紅色帽

    4

    抗體工作液

    7ml

    藍(lán)色帽

    5

    底物A

    7ml

    白色帽

    6

    底物B

    7ml

    黑色帽

    7

    終止液

    7ml

    黃色帽

    8

    20X濃縮洗滌液

    40ml

    白色帽

    9

    2X濃縮復(fù)溶液

    50ml

    透明帽

    四、所用儀器、試劑

    具備的儀器微孔酶標(biāo)儀、打印機(jī)、均質(zhì)器 、氮氣吹干裝置、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平(感量0.01g)

    微量移液器:單道 20200ul、單道1001000ul、多道 250 ul

          劑:濃鹽酸、二氯甲烷、正己烷、乙腈、肝素鈉、Na2HPO4·12H2O、NaH2PO4·2H2O

    五、樣本前處理步驟

    樣本處理前須知

    處理任何樣本時,都必須注意:

    (a) 本試劑盒所檢測的組織樣本包括:動物組織、禽類和水產(chǎn)組織。eg:雞、鴨、牛、兔、魚、蝦等。

    (b) 實驗中必須使用一次性吸頭,在吸取不同的試劑時要更換吸頭。

    (c) 實驗之前須檢查各種實驗器具是否干凈,必要時可對實驗器具進(jìn)行清潔,以避免污染干擾實驗結(jié)果。

    樣本前處理需配制:

    配液1  0.1M HCL溶液:  

            860µl濃鹽酸加去離子水100ml溶解。

    配液2  乙腈-二氯甲烷混合溶液:

             V乙腈V二氯甲烷  =  1 : 4

    配液3  pH7.2  0.02M PB緩沖液:      

       5.16g Na2HPO4·12H2O + 0.87g NaH2PO4·2H2O  

        加去離子水1L溶解。

    配液4  乙腈-二氯甲烷-0.1MHCl混合溶液

    100ml乙腈-二氯甲烷(V乙腈V二氯甲烷  = 4 :1) 混合溶液中加入5ml 0.1M HCl溶液。

    配液5  用去離子水將2X濃縮復(fù)溶液按1:1稀釋  

    1份濃縮復(fù)溶液+1份去離子水)用于樣本復(fù)溶。

    (a)組織樣本(雞肉/肝、豬肉/肝、蝦、魚等)雞蛋

    1、稱2.0±0.05g 均質(zhì)過的組織樣本于50ml離心管中;

    2、加入乙腈-二氯甲烷混合溶液8ml,振蕩5min,4000r/min以上,15℃離心10min;

    3、取4ml有機(jī)相至干燥容器中,56℃氮氣吹干/旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干;

    4、用1ml稀釋后的復(fù)溶液溶解干燥的殘留物,加入正己烷1ml混合30s,4000r/min以上,15℃離心5min;

    5、去除上層取下層50µl液體用于分析。

         樣本稀釋倍數(shù):1

    b)血清樣本的處理

    1、用加有肝素鈉(20-30單位/ml血)的離心管采集雞血樣本(建議采血注射器也用肝素鈉潤洗),血樣本室溫靜置1h,待析出血漿后4000r/min以上,15℃離心10min,取出血漿1ml;

    2、加入乙腈(無水)4ml上下充分混合5min,4000r/min以上,15℃離心10min;

    3、移上清至另一離心管中,加入2ml 0.02M PB緩沖液,混勻;

    4、加入二氯甲烷5ml,充分混勻5min,4000r/min,15℃離心10min,去上層,取下層有機(jī)相到干燥瓶中(清亮無雜質(zhì)),50℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干/氮氣吹干;

    5、1ml稀釋后的復(fù)溶液溶解干燥的殘留物,加入正己烷1ml混合30s,4000r/min以上,15℃離心5min;

    6、輕吸掉上層和中間白色雜質(zhì),取下層相100µl加入100µl稀釋后的復(fù)溶液,混合30s;

    7、50µl用于分析。

           樣本稀釋倍數(shù):2

    c)蜂蜜樣本處理方法:

    1、 2.0±0.05g蜂蜜樣本于50ml離心管中;加入8ml乙腈-二氯甲烷-0.1MHCl混合溶液, 充分振蕩3min,15℃ 4000r/min以上離心10min;

    2、 2ml上清液于56℃氮氣或空氣流吹干;

    3、 加入1ml的樣本復(fù)溶液,充分震蕩1min;

    4、 50µl用于分析。

    樣本稀釋倍數(shù):  2倍

    六、 酶標(biāo)免疫分析程序:

    測定前應(yīng)須知:

    1、 使用前將需用試劑和板條的溫度回升至室溫(20-25℃)。

    2、 使用之后立即將所有試劑放回2-8℃。

    3、 ELISA分析中的再現(xiàn)性,很大程度上取決于洗板的一致性,正確的洗板操作是ELISA測定程序中的要點。

    4、 所有恒溫孵育過程,避免光線照射,用蓋板膜蓋住微孔板。

    操作步驟:

    5、 將試劑盒從冷藏環(huán)境中取出并將所需試劑從試劑盒取出,置室溫(20-25℃)平衡30min以上, 注意每種液體試劑使用前均須搖勻

    6、 按需要取出微孔條及板架,將不用的微孔板重新密封,保存于2-8℃,不要冷凍

    7、 配液:將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水按照1:19稀釋(1份濃縮洗滌液+19份去離子水),或按所需用量配制洗滌液。

    8、 編號:將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)微孔按序編號,每個樣本和標(biāo)準(zhǔn)品均需做2孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔的樣本孔所在的位置。

    9、 加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本50µl /孔,然后加酶標(biāo)記物50μl/孔,再加入抗體工作液50µl/孔。輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板,25℃環(huán)境反應(yīng)30min。

    10、 用洗滌液按每孔250μl洗板4-5次,每次浸泡15-30秒,拍干(拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破)。

    11、 顯色:每孔加入底物A液50µl再加入底物B液50µl,輕輕振蕩混勻,25℃環(huán)境避光顯色15min

    12、 測定:每孔加入終止液50µl,輕輕振蕩混勻,設(shè)定酶標(biāo)儀于450nm處(建議用雙波長450/630nm檢測,在5min內(nèi)讀完數(shù)據(jù)),測定吸光度值(OD值)。

    七、結(jié)果判定

    結(jié)果判定有兩種方法,粗略判定可用第1種方法,定量判定用第2種方法。注意樣本吸光度值與其所含恩諾沙星藥物量成負(fù)相關(guān)。

    1、粗略判定:

        用樣本的平均吸光度值與標(biāo)準(zhǔn)品比較即可得出其濃度范圍(ng/ml)。假設(shè)樣本1的吸光度值為0.238, 樣本2的吸光度值為0.946,標(biāo)準(zhǔn)液吸光度值分別是:0ppb為1.845; 1ppb為1.542;3ppb為1.130; 9ppb為0.635;27ppb為0.326; 81ppb為0.156。則樣本1的濃度范圍是27ppb - 81ppb;樣本2的濃度范圍是3ppb - 9ppb。乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中恩諾沙星藥物的實際濃度。

    2、定量分析

    1)百分吸光率的計算,標(biāo)準(zhǔn)品或樣本的百分吸光率等于標(biāo)準(zhǔn)品或樣本的吸光度值的平均值(雙孔)除以第一個標(biāo)準(zhǔn)(0標(biāo)準(zhǔn))的吸光度值,再乘以100%,即

    百分吸光率(%)=

    B

    ×100%

    B0

    B—標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣本溶液的平均吸光度值

    B0—0ng/ml標(biāo)準(zhǔn)溶液的平均吸光度值

    2)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制與計算

    以標(biāo)準(zhǔn)品百分吸光率為縱坐標(biāo),以恩諾沙星標(biāo)準(zhǔn)品濃度(ng/ml)的半對數(shù)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出樣本所對應(yīng)的濃度,乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中恩諾沙星藥物實際濃度。

    若利用試劑盒專業(yè)分析軟件進(jìn)行計算,更便于大量樣本的準(zhǔn)確、快速分析。(歡迎來電索?。?/span>

    八、 注意事項

    1、 室溫低于25℃或試劑及標(biāo)本未回到室溫(20-25℃)會導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低。

    2、 在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,則會伴隨著標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性,重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。

    3、 混合要均勻,否則會出現(xiàn)重復(fù)性不好的現(xiàn)象。

    4、 反應(yīng)終止液為2M硫酸,避免接觸皮膚。

    5、 不要使用過了有效日期的試劑盒;稀釋或攙雜使用會引起靈敏度、OD值變化;不要交換使用不同批號的盒中試劑。

    6、 不用的微孔板放進(jìn)自封袋重新密封;標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和無色的發(fā)色劑對光敏感,因此要避免直接暴露在光線下。

    7、 顯色液若有任何顏色表明變質(zhì),應(yīng)當(dāng)棄之。標(biāo)準(zhǔn)品1的吸光度值小于0.5時,表示試劑可能變質(zhì)。

    8、 該試劑盒最佳反應(yīng)溫度為25℃,溫度過高或過低將導(dǎo)致檢測吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。

    九、儲藏條件和保質(zhì)期

    1、 儲藏條件:試劑盒于2-8保存,不要冷凍。

    2、  質(zhì) 期:該產(chǎn)品有效期為1年,生產(chǎn)日期見包裝盒。

    提示:酶標(biāo)板真空包裝袋若有漏氣,酶標(biāo)板仍然正常有效,不影響實驗結(jié)果,請放心使用。

     

    2011年開始我們致力于在生命科學(xué)領(lǐng)域、生物醫(yī)學(xué)實驗外包及論文潤色服務(wù),協(xié)助客戶各類實驗服務(wù)及論文潤色,是客戶您值得信賴的科研合作伙伴!

    如果您受時間、試驗條件等限制而無法完成您的課題研究,歡迎您與我們聯(lián)系。

     

    實驗代做服務(wù):

     


    滬公網(wǎng)安備 31011802001676號

    视频一二三区| 加勒比久久久| 长岭县| 国产人妻无码一区二区三区不卡| 一级a性生活片久久无| 麻豆久久久久久久| 五月天色导航| 精品少妇人妻AV无码专区在线| 日本黄网站| 91麻豆精品国产91久久久熟女| 人人澡人人妻人人爽欧美一区 | 婷婷国产成人精品免费视频| 无码精品黑人| 国产精品久久久久久人妻爽| 爽妓女8888视频免费观看| 蜜芽无码视频| 天天操天天干天天日| 黑人精品一区二区在线播放| 人人爽人人aV| 久久久青草| 人妻丰满熟妇无码区| 欧美一区二区三区啪啪啪| 污污污污污在线观看| 福利导航在线视频| 操美女的网站| 熟女草逼| 熟女乱亚洲| 稷山县| 久久夜夜夜| 精品国产乱码久| 丁香五月激情网站| 亚洲有无码| 江山市| 国产AV激情| 久久精品国产亚洲AV麻豆白洁| wwwji| 久久人妻少妇嫩草无码专区| 丝袜熟女91| a级黄色网址| 亚洲熟女天堂| 麻豆亚洲AV成人无码久久精品|