性欧美熟妇,综合另类人妻,人妻系列免费无码专区,久久精品蜜芽,亚洲色婷婷在线

  1. 當(dāng)前位置:
    首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 己烯雌酚殘留物快速檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
    目錄導(dǎo)航 Directory
    服務(wù)熱線
    技術(shù)支持Article
    己烯雌酚殘留物快速檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
    點(diǎn)擊次數(shù):1262 更新時(shí)間:2022-02-09

    EF20A\J2                      2016-01

    己烯雌酚

    快速檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

    一、原理

    本試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法,在微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原,樣本中的殘留物己烯雌酚將和微孔條上預(yù)包被的偶聯(lián)抗原競(jìng)爭(zhēng)抗己烯雌酚抗體,加入酶標(biāo)記物后,用TMB底物顯色,樣本吸光值與其所含殘留物己烯雌酚的含量成負(fù)相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出相應(yīng)殘留物己烯雌酚的含量。

    二、試劑盒特性

    試劑盒靈敏度:   0.1ppb

    孵育溫度:       37

    孵育時(shí)間:       30min30min15min

    樣本檢測(cè)下限

    組織(蝦、魚(yú)) ·······························  0.2 ppb

    豬肉/ 雞肉/  ·······························  2 ppb

    肌肉組織(方法二)  ···························  0.1 ppb

       ············································  20ppb

    尿   ···········································  0.6ppb

    交叉反應(yīng)率

    己烯雌酚  ········································  100%

    雙烯雌酚  ········································  38.5%

    己烷雌酚  ········································  8.5%

    己炔雌二醇  ···································  0.1%

    雌三醇  ·········································  0.1%

    樣本回收率

       ··········································  90±10%

       ··········································  85±10%

    尿   ··········································  70±10%

    三、試劑盒組成

    1

    微量測(cè)試孔

    每條8孔,一板12

    2

    標(biāo)準(zhǔn)液×6

    1ml/瓶)

    0ppb

    0.1ppb

    0.3ppb

    0.9ppb

    2.7ppb

    8.1ppb

    3

    酶標(biāo)記物

    12ml

    紅色帽

    4

    抗體工作液

    7ml

    藍(lán)色帽

    5

    底物A

    7ml

    白色帽

    6

    底物B

    7ml

    黑色帽

    7

    終止液

    7ml

    黃色帽

    8

    20X濃縮洗滌液

    40ml

    白色帽

    9

    5X濃縮復(fù)溶液

    50ml

    透明帽

    四、所用儀器、試劑

    具備的儀器:酶標(biāo)儀、均質(zhì)器、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平(感量0.01g)、氮吹儀、恒溫箱

    微量移液器:?jiǎn)蔚?/span> 20200µl、單道1001000µl、多道 30300 µl

          劑:乙腈、氫氧化鈉、氯仿、丙酮、濃磷酸(含量85%)、乙酸乙酯

    五、樣本前處理步驟

    樣本處理前須知

    a)實(shí)驗(yàn)中必須使用一次性吸頭,吸取不同試劑時(shí)要更換吸頭。

    b)實(shí)驗(yàn)之前須檢查各種實(shí)驗(yàn)器具是否干凈,必要時(shí)可對(duì)實(shí)驗(yàn)器具進(jìn)行清潔,以避免污染干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

    樣本前處理需配制:

    配液1   6M H3PO4 溶液

    100ml H3PO4(含量85%)加去離子水150ml混合均勻。

    配液2   2M NaOH溶液

    8gNaOH加去離子水100ml溶解。

    配液3   1M NaOH溶液

    4gNaOH加去離子水100ml溶解。

    配液4   乙腈-丙酮混合液

    V乙腈-V丙酮  =  4 : 1

    配液5   樣本復(fù)溶液:

    5X濃縮復(fù)溶液用去離子水14稀釋。

    樣本處理:

    a)組織(雞、鴨、豬肉/豬肝、蝦、魚(yú))處理方法

    1、 稱取2±0.05g勻漿后的樣本,加入6ml乙腈-丙酮混合液,震蕩2min,15℃,4000r/min以上,離心10min

    2、 3ml上清液,60℃氮?dú)?/span>/空氣吹干。

    3、 加入0.5ml氯仿,渦動(dòng)20s,加入2ml 2M NaOH,渦動(dòng)30s,4000r/min以上,離心5min。

    4、 1ml上清液,加入200µl 6M H3PO4,渦動(dòng)5s。

    5、 加入3ml乙腈萃取,振蕩2min,室溫4000r/min以上,離心10min,取上層有機(jī)相, 60℃氮?dú)?/span>/空氣吹干。

    6、 1ml樣本復(fù)溶液溶解干燥的殘留物,混勻30s。

    不同樣本按如下方法稀釋:

    1、 蝦魚(yú):直接取50µl水相用于檢測(cè)。

    2、 豬肉/肝、雞肉/肝:50µl水相加入450µl樣本復(fù)溶液,渦動(dòng)混合30s;取50µl用于檢測(cè)。

    樣本的稀釋倍數(shù):

    蝦魚(yú)稀釋倍數(shù):2       

    豬肉/肝、雞肉/肝稀釋倍數(shù):20

    b)肌肉組織處理方法二

    1、 稱取2±0.05g勻漿后的樣本,加入2ml  2M NaOH溶液,震蕩2min

    2、 加入8ml乙酸乙酯,劇烈震蕩5min ; 

    3、 15,4000r/min以上,離心10min;

    4、 4ml上層有機(jī)相, 60℃氮?dú)?/span>/空氣吹干;

    5、 1ml樣本復(fù)溶液溶解干燥的殘留物,混勻30s。

    樣本稀釋倍數(shù):1

    c)飼料處理方法

    1、 稱取2±0.05g搗粹后的飼料樣本,加入8ml乙腈,振搖2min,15 4000r/min以上離心10min

    2、 2ml上清液,60℃氮?dú)?/span>/空氣吹干;

    3、 加入0.5ml氯仿,渦動(dòng)20s,加入2ml 1M NaOH,渦動(dòng)30s4000r/min以上,離心5min

    4、 1ml上清液,加入100µl 6M H3PO4,渦動(dòng)5s

    不同樣本按如下方法稀釋

    1、 配合料:取50µl,加入950µl樣本復(fù)溶液,渦動(dòng)混勻30s,取50µl 用于檢測(cè)。

    2、 濃縮料/預(yù)混料:取25µl,加入975µl樣本復(fù)溶液,渦動(dòng)混勻30s,取50µl 用于檢測(cè)。

    樣本稀釋倍數(shù):

    配合料稀釋倍數(shù):100       

    濃縮料、預(yù)混料稀釋倍數(shù):200  

    d 尿樣樣本處理方法

    1、 2ml尿液到離心管中,室溫4000r/min以上,離心10min,直至清亮;

    2、 移取1ml清亮尿液至離心管中,加入1ml 1M NaOH強(qiáng)烈振蕩5min;

    3、 加入100µl  6M H3PO4,渦動(dòng)30 s

    4、 再加入8ml氯仿進(jìn)行萃取,振蕩5min。154000r/min以上離心10min;

    5、 去掉上層的水相,取下層有機(jī)相4 ml,60氮?dú)?/span>/空氣吹干;

    6、 3ml樣本復(fù)溶液干燥的殘留物,混合30s

    7、 50µl用于分析。

    樣本稀釋倍數(shù):6

    六、 酶標(biāo)免疫分析程序:

    測(cè)定前應(yīng)須知:

    1、 使用前將需用試劑和板條的溫度回升至室溫(2025)。

    2、 使用之后立即將所有試劑放回28。

    3、 ELISA分析中的再現(xiàn)性,很大程度上取決于洗板的一致性,正確的洗板操作是ELISA測(cè)定程序中的要點(diǎn)。

    4、 所有恒溫孵育過(guò)程,避免光線照射,用蓋板膜蓋住微孔板。

    操作步驟:

    1、 28冷藏環(huán)境中取出所需試劑,室溫(2025)平衡30min以上,注意每種液體試劑使用前均須搖勻。

    2、 取出框架及需要數(shù)量的微孔,將不用的微孔放入自封袋,保存于2-8

    3、 配液:將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水按照119稀釋(1份濃縮洗滌液+19份去離子水),或按所需用量配制洗滌液。

    4、 編號(hào):將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。

    5、 加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本50µl/孔到各自的微孔中,然后加加入抗體工作液50µl/孔,用蓋板膜封板,輕輕振蕩混勻。37環(huán)境中反應(yīng)30min

    6、 將孔內(nèi)液體甩干,用已稀釋的洗滌液250µl/孔洗板45次,每次間隔1530秒,用吸水紙拍干(拍干后未清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破)。

    7、 每孔加入酶標(biāo)記物100µl,蓋板膜蓋板后置37℃環(huán)境中反應(yīng)30min。將孔內(nèi)液體甩干,用洗滌液充分洗,45遍(同上),用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破)。

    8、 顯色:加入底物A50µl/孔,再加入底物B50µl/孔,輕輕振蕩混勻,37環(huán)境中避光顯色15min。

    9、 測(cè)定:加入終止液50µl/孔,輕輕振蕩混勻,設(shè)定酶標(biāo)儀于450nm處(建議用雙波長(zhǎng)450/630nm檢測(cè),5min內(nèi)讀數(shù)),測(cè)定每孔OD值。

    七、結(jié)果判定

    結(jié)果判定有兩種方法,粗略判定可用第1種方法,定量判定用第2種方法。注意樣本吸光度值與其所含己烯雌酚量成負(fù)相關(guān)。

    1、粗略判定:

    用樣本的平均吸光度值與標(biāo)準(zhǔn)值比較即可得出其濃度范圍(ng/ml)。假設(shè)樣本1的吸光度值為0.3,樣本2的吸光度值為1.0,標(biāo)準(zhǔn)液吸光度值分別是:0ppb2.243; 0.1ppb1.8160.3ppb1.415;0.9ppb0.742.7ppb0.313;8.1ppb0.155。則樣本1的濃度范圍是2.7ppb8.1ppb;樣本2的濃度范圍是0.3ppb0.9ppb,乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中己烯雌酚實(shí)際濃度。

    2、定量分析

    1)百分吸光率的計(jì)算,標(biāo)準(zhǔn)品或樣本的百分吸光率等于標(biāo)準(zhǔn)品或樣本的吸光度值的平均值(雙孔)除以第一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)(0標(biāo)準(zhǔn))的吸光度值,再乘以100%,即

    百分吸光%)=

    B

    ×100%

    B0

    B—標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣本溶液的平均吸光度值

    B0—0ng/ml標(biāo)準(zhǔn)溶液的平均吸光度值

    2)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制與計(jì)算

    以標(biāo)準(zhǔn)品百分吸光率為縱坐標(biāo),以己烯雌酚標(biāo)準(zhǔn)品濃ng/ml)的半對(duì)數(shù)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出樣本所對(duì)應(yīng)的濃度,乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中己烯雌酚實(shí)際濃度。

    若利用試劑盒專業(yè)分析軟件進(jìn)行計(jì)算,更便于大量樣本的準(zhǔn)確、快速分析。(歡迎來(lái)電索?。?/span>

    八、 注意事項(xiàng)

    1、 室溫低于25℃或試劑及標(biāo)本未回到室溫(2025℃)會(huì)導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低。

    2、 在洗板過(guò)程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,則會(huì)伴隨著標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性,重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。

    3、 混合要均勻,否則會(huì)出現(xiàn)重復(fù)性不好的現(xiàn)象。

    4、 反應(yīng)終止液為2M硫酸,避免接觸皮膚。

    5、 不要使用過(guò)了有效日期的試劑盒;稀釋或攙雜使用會(huì)引起靈敏度、OD值變化;不要交換使用不同批號(hào)的盒中試劑。

    6、 不用的微孔板放進(jìn)自封袋重新密封;標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和無(wú)色的發(fā)色劑對(duì)光敏感,因此要避免直接暴露在光線下。

    7、 顯色液若有任何顏色表明變質(zhì),應(yīng)當(dāng)棄之。標(biāo)準(zhǔn)品1的吸光度值小于0.5時(shí),表示試劑可能變質(zhì)。

    8、 該試劑盒最佳反應(yīng)溫度為37℃,溫度過(guò)高或過(guò)低將導(dǎo)致檢測(cè)吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。

    九、儲(chǔ)藏條件和保質(zhì)期

    1、 儲(chǔ)藏條件:試劑盒于2-8保存,不要冷凍。

    2、  質(zhì) 期:該產(chǎn)品有效期為1年,生產(chǎn)日期見(jiàn)包裝盒。

    提示:酶標(biāo)板真空包裝袋若有漏氣,酶標(biāo)板仍然正常有效,不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,請(qǐng)放心使用。

     

    2011年開(kāi)始我們致力于在生命科學(xué)領(lǐng)域、生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)外包及論文潤(rùn)色服務(wù),協(xié)助客戶各類實(shí)驗(yàn)服務(wù)及論文潤(rùn)色,是客戶您值得信賴的科研合作伙伴!

    如果您受時(shí)間、試驗(yàn)條件等限制而無(wú)法完成您的課題研究,歡迎您與我們聯(lián)系。

     

    實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):

     

     


    滬公網(wǎng)安備 31011802001676號(hào)

    乱妇乱女熟妇熟女网| 人人妻人人澡人人| 资兴市| 人人人人人人人人人操| 91九色国产盗摄老熟妇| 中文字幕精品人妻丝袜| 99热18| 精品性爱视频| 大乳巨爆乳中文字幕巨无霸| 狠狠干2024| 亚洲精品成a人在线观看网站| 美女啪啪网站| 性爱国产视频| 人妻精品久久久久中国字幕| 婷婷黄色成人网站| 黄色动漫在线看| 欧美日韩精品人妻| 污污污www在线观看免费午夜| 欧美aa久久| 一区二区三区水蜜桃| 无码精品人妻一区二区三区接种 | 谷城县| 伊人久久久大香线蕉综合直播下载| 88AV在线| 欧美黑人又大又粗XXXXX| AV操逼网| 亚洲成人无码自拍| 男人天堂资源| 亚洲熟女www| 威宁| 成人黄色小视频在线观看| 欧美人人干| 97成人人妻一区二区三区| 中出人妻中文字幕无码| 射区导航| 91人妻澡| 无码乱区| 午夜欧美一区二区三区免费观看 | 人人射人人操人人干| 国产成人精品一区二三区熟女在线 | 亚洲人妻影院|