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    DRG 大鼠背根神經(jīng)細(xì)胞
    點(diǎn)擊次數(shù):1100 更新時(shí)間:2020-09-14

    DRG 大鼠背根神經(jīng)細(xì)胞

    Product Format: a T25 flask

    Culture Properties貼壁

    Complete Growth Medium: 89%H-DMEM+10%FBS+1%雙抗

    Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%

    Application:  Cells and cancer research

    NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.

     

    Components  

    Item

    Specifications

    a T25 flask

    2X106

    Manual

    1 copy

     

    Operation steps for cell culture

    • 吸走多余培養(yǎng)基,加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細(xì)胞;
    • 吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培養(yǎng)皿使胰酶浸沒細(xì)胞表面,培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱消化;
      (細(xì)胞對于消化比較敏感,消化過度會嚴(yán)重影響細(xì)胞狀態(tài),導(dǎo)致細(xì)胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長。細(xì)胞消化到細(xì)胞間隙變大但未脫落,可以輕輕吹下時(shí)即可終止,禁止消化到細(xì)胞*漂浮?;靹蚣?xì)胞時(shí)盡量輕柔,不要吹出大量氣泡。)
    • 加入6-8ml*培養(yǎng)基終止消化,輕輕吹下細(xì)胞混勻;
    • 將混勻的細(xì)胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,再用新鮮培養(yǎng)基重懸37度培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng);

    傳代比例: 不同細(xì)胞生長速度不一,具體傳代比例視細(xì)胞生長速度而定,大部分細(xì)胞適用1:3-1:4傳代,生長較慢的細(xì)胞可以1:2傳代。

    Cell cryopreservation

    1.凍存液:92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)室條件自行選擇)

    2.降溫步驟:4度10min,-20度2h,-80過夜后液氮保存。

    Tips:

    • 細(xì)胞經(jīng)過運(yùn)輸后,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900-1000rpm(約150g)離心3min,棄上清。加5ml PBS重懸細(xì)胞,再900-1000rpm(約150g)離心3min,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸接種到新的培養(yǎng)瓶。第二次PBS重懸是為了去除碎片,如果平時(shí)碎片比較少,傳代時(shí)可以省略PBS重懸的步驟;如果碎片很多,建議PBS多洗次。
    • 細(xì)胞生長不均時(shí),可以將細(xì)胞消化吹散后加入新的培養(yǎng)基重新接種或傳代。
    • 細(xì)胞生長緩慢時(shí),可以選擇提高血清濃度培養(yǎng)(不超過20%),也可以根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài),選擇傳代細(xì)胞到新的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。

    不同細(xì)胞貼壁性差異比較大,所以消化時(shí)間差別較大,20s-10min均有可能,具體以細(xì)胞消化到相互分離但未脫落,并可以輕輕吹下為準(zhǔn),嚴(yán)禁消化到細(xì)胞*漂浮。

     

    實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):

     

    免疫組化IHC染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)

    細(xì)胞、組織TUNEL凋亡染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)

    試劑盒免費(fèi)代檢測

    實(shí)驗(yàn)室代做實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目

     

    透射電鏡服務(wù)實(shí)驗(yàn)服務(wù)

    石蠟/冰凍切片TUNEL凋亡

    核仁組成區(qū)嗜銀-AGNOR染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)

    免疫共沉淀(CHIRP)實(shí)驗(yàn)

    RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀(RIP)實(shí)驗(yàn)代做

    酶聯(lián)免疫(ELISA)技術(shù)服務(wù)

    雞傳染性法氏囊病病毒VP2抗體診斷試劑盒

    喹諾酮類快速檢測試劑盒

    組織芯片/微陣列定制技術(shù)服務(wù)

     

    染色質(zhì)免疫沉淀分析(CLIP)實(shí)驗(yàn)服務(wù)

     

    多因子液相芯片技術(shù)(Luminex)實(shí)驗(yàn)

    免疫細(xì)胞化學(xué)ICC實(shí)驗(yàn)服務(wù)

    ATP/ADP檢測實(shí)驗(yàn)服務(wù)

    蛋白雙向(2-D)電泳實(shí)驗(yàn)服務(wù)

    蛋白相互作用分析

    堿性磷酸酶染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)

    PKC活性檢測實(shí)驗(yàn)

    非標(biāo)定量實(shí)驗(yàn)

    (Label-free)

     

    DIGE技術(shù)實(shí)驗(yàn)服務(wù)

    端粒酶活性檢測實(shí)驗(yàn)

    細(xì)胞生長曲線的測定

    掃描電鏡服務(wù)

    NF-KB p65活性檢測實(shí)驗(yàn)

     

    慢病毒包裝實(shí)驗(yàn)服務(wù)

    滬公網(wǎng)安備 31011802001676號

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