性欧美熟妇,综合另类人妻,人妻系列免费无码专区,久久精品蜜芽,亚洲色婷婷在线

  1. 當前位置:
    首頁 > 技術文章 > BCA蛋白定量試劑盒說明書
    目錄導航 Directory
    服務熱線
    技術支持Article
    BCA蛋白定量試劑盒說明書
    點擊次數(shù):2443 更新時間:2020-06-19

      

     

    BCA蛋白定量試劑盒說明書

     

    BCA Protein Assay Kit

    BCA蛋白定量試劑盒

     

    目錄號:K0014

     

     

    保存條件:BSA標準品2-8℃保存,其它組分室溫保存。

     

     

    組分說明

     

                Cat. No.                             K0014

                Kit Size                     500 次/微孔,50 次/試管

                試劑  A                                 100 ml

                試劑  B                                  3 ml

                BSA 標準品 (2mg/ml)                       2 ml

     

     

                   本產品僅供科研使用,請勿用于臨床診斷及其他用途  

     

     

    產品簡介

     

      BCA蛋白定量法是目前廣泛使用的蛋白定量方法之一。本產品是基于  BCA(Bicin

    -choninic   Acid)法研制而成,實現(xiàn)了對蛋白質進行快速、穩(wěn)定、靈敏的濃度測定。其

    原理是在堿性環(huán)境下蛋白質分子中的肽鏈結構能與Cu2+絡合生成絡合物,同時將Cu2+

    處原成有高的光吸收Cu+。BCA試劑值,可敏感特異地與顏色的深淺與蛋白Cu結質濃合,形成度成正比,可根據(jù)吸收穩(wěn)定的有顏色的復值合物。在的大小來562測 定蛋nm

    白質的含量。本試劑盒含有牛血清白蛋白( BSA)溶液作為蛋白質標準品溶液,測定

    范圍為20~2000 μg/ml。

     

    注意事項

     

    1.本產品可以采用分光光度計(試管檢測法)或者酶標儀(微孔檢測法)測定蛋白濃度。

    2.建議每次測定蛋白樣品時,繪制標準曲線,以獲得準確數(shù)據(jù)。

    3.BSA標準品的稀釋液需與待測樣品的稀釋液一致(可用1×PBS或0.9%生理鹽水進行

       稀釋)。

    4.完成37℃孵育30分鐘或室溫孵育2小時后,須在3-5分鐘內完成檢測,否則會影響蛋

       白定量的準確度。

    5.如待測樣品中含較多的干擾物質(具體見附表1),可采用Bradford法蛋白定量試劑

       盒(K0013)或其他蛋白定量產品。

     

    操作步驟

     

    1.稀釋BSA標準品:用與待測蛋白樣品相一致的稀釋液按下表稀釋BSA標準品。

     

                                            

                                                       

    管號      稀釋液用量(μl)  BSA標準品用量(μl)   BSA標準品終濃度(μg/μl)

                                                            

    A                0                100                       2

    B               200               200                       1

    C               200         200(從B管中?。?              0.5

    D               200         200(從C管中?。?              0.25

    E               200         200(從D管中?。?             0.125

    F               200         200(從E管中取)              0.0625

    G               200                0                       0(空白)

     

    2.配置BCA工作液:

       1)計算BCA工作液總量:                      

       BCA工作液總量=(BSA標準品樣本個數(shù)+未知樣本個數(shù))×復孔數(shù)×每個樣本BCA工作液體積

       舉例:BSA標準品樣本個數(shù)為7個,未知樣本個數(shù)2個,復孔數(shù)3個。

     

       試管檢測法:

     

       BCA工作液總量=(7個BSA標準品樣本+2個未知樣本)×3個復孔×2 ml/每個樣本工作液體積=54 ml

       微孔檢測法:

     

       BCA工作液總量=(7個BSA標準品樣本+2個未知樣本)×3個復孔×200 μl/每個樣本工作液體積=5.4ml

       2)根據(jù)計算出的BCA工作液需要總量,將試劑A和試劑B按照50:1的體積比,配制

       BCA工作液,充分混勻。

     

       注意:1)由于加樣可能存在誤差,建議配制BCA工作液時,多配制1-2個孔。

       2)新配制的BCA工作液室溫密封條件下可穩(wěn)定保存24小時。

    3.定量檢測

    3a.試管檢測法(蛋白濃度檢測范圍:20-2000 μg/ml)

       1)按上表,將稀釋好的A-G BSA標準品和待測蛋白樣品(原液或稀釋液)各100 μl

       分別加到作好標記的試管中。推薦每個測定的樣本做2-3個平行反應。

       2)向每個試管中各加入2 ml BCA工作液,充分混勻,37℃水浴中孵育30分鐘或室

       溫孵育2小時。

       3)將各管冷卻至室溫。

       4)用分光光度計在562 nm處測定每個樣品及BSA標準品的吸光值,同時做好記錄。

       5)繪制標準曲線,計算樣品中的蛋白濃度。

    3b.微孔檢測法(蛋白濃度檢測范圍:20-2000 μg/ml)

       1)按上表,將稀釋好的A-G BSA標準品和待測蛋白樣品(原液或稀釋液)各25 μl分

       別加到作好標記的96孔板微孔中。推薦每個測定的樣本做2-3個平行反應。

       2)每孔加入200 μl BCA工作液,充分混勻,蓋上96孔板蓋,37℃孵育30分鐘。

       3)冷卻至室溫。

       4)用酶標儀在540-590 nm范圍內,測定每個樣品及BSA標準品吸光值,做好記錄。

       5)繪制標準曲線,計算樣品中的蛋白濃度。

     

       注意:1)BCA法測定蛋白濃度時,吸光值會隨著時間的延長不斷加深。因此所有樣品測定需在3-5 分鐘內完成,否則會影響蛋白定量的準確度。

     

       2)建議以去除背景值后的吸光值讀數(shù)繪制標準曲線。

     

       3)由于操作誤差導致標準品讀數(shù)嚴重偏離線性曲線的應舍去。

     

       4)未知樣品濃度可以從標準曲線方程中計算得出, 實際濃度需要乘以樣品的稀釋倍數(shù)。

       5)如果得到的蛋白濃度不在檢測范圍內,請重新稀釋樣品后再次測定。

     

        4.BCA蛋白定量分析結果舉例:

                   

    免疫組化IHC染色實驗服務

    掃描電鏡服務

     

    滬公網(wǎng)安備 31011802001676號

    亚洲无码自拍| 韩国三级HD中文久久精品车子 | 国产成人精品男人的天堂538 | 亚洲va中文字幕| 精品人妻无码一区二区三区4| 亚洲有无码| jk美女自慰喷水| 精品人妻一区二区三区-国产精品 久久精品人妻一区二区三区 | 97熟女| 熟妇成人网| 性欧美久久久| 亚洲精品人妻视频| 成年人激情网站| 欧美性爱在线观看| 久久婷婷伊人| 亚洲精品Aⅴ| 成人七区| 最新国产拍偷乱偷精品| 四虎精品在永久在线观看| 福利视频导航一区二区| 狠狠干人人操| 91青青草在线| 久久桃花网| 久久男人天堂| 中文字幕人成乱码熟女免费69| 亚洲人妻少妇av| 麻豆少妇精品无聊玛区| 四虎影库AV| 精品人妻二区中文字幕| 国产91熟女高潮一区二区| 一级a一级a爰片免费免免韩国| 国产无码白浆| 印江| 波多野结衣毛片| 日本污网站| 精品国产99久久久久久www| 91人人妻人人澡人人爽人人狠| 婷婷五月国产| 人妻无码综合| 乐至县| 日韩第一无码|